Laporan Mikrobiologi Penyiapan Meidum

BAB I

PENDAHULUAN

A.    Latar Belakang

Kehidupan ini tak luput dari adanya makhluk hidup yang saling berdampingan. Makhluk hidup ada yang berukuran mikro dan ada yang berukuran makro. Yang berukuran makro misalnya manusia, hewan, dan tumbuhan. Intinya makhluk hidup yang dapat dilihat oleh mata telanjang. Untuk makhluk mikro misalnya seperti bakteri dan virus.

Virus dan bakteri merupakan makhluk hidup yang patogen di mana mereka dapat menjadi parasite dalam kelangsungan hidup manusia. Meskipun kedua makhluk ini sifatnya patogen, namun di dunia Mikrobiologi mereka malah dikembangbiakkan demi kepentingan studi ilmu pegetahuan. Hal ini dimaksudkan untuk manusia dapat mempelajari bagaimana struktur hidup mikroba tersebut dan bagaimana cara mengembangbiakkan serta cara menghindari penularan penyakit yang disebabkan oleh mikroba tersebut.

Untuk pengembangan mikroba diperlukan sebuah medium untuk perkembangbiakannya. Medium inilah yang nantinya berfungsi sebagai tempat di mana mikroba itu memperbanyak diri. Medium yang digunakan harus dalam keadaan steril yang dimaksudkan adalah medium tersebut tidak terjangkit kontaminasi mikroba lain dari luar yang akan mengganggu perkembangbiakan mikroba yang kita inginkan. Medium medium tersebut banyak macamnya tergantung dari pembagiannya. Paling umum yang kita lihat adalah medium agar, semu agar, dan juga cair. Pembuatan medium tersebut tidak sembarangan. Medium medium yang digunakan juga memerlukan bahan lain yang perlu ditimbang dengan ketelitian tinggi di mana harus menggunakan neraca analitik untuk menimbangnya. Dalam pemanasanpun juga tidak boleh ditinggal dan harus terus diaduk agar bawahannya tidak gosong.

Berdasarkan pemaparan di atas, maka dilakukanlah sebuah praktikum mengenai ‘Penyiapan Medium’ yang di mana tujuannya untuk mengetahui klasifikasi medium dan bagaimana cara pembuatan medium yang baik.

B.     Tujuan

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui bagaimana cara penyiapan medium mikroba.

C.    Manfaat

Adapun manfaat dari praktikum ini adalah agar praktikan dapat mengetahui bagaimana cara penyiapan medium mikroba

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

            Bakteri untuk pertumbuhannya memerlukan beberapa unsur logam seperti natrium, kalium, kalsium, magnesium, mangan, besi, seng, tembaga, forfor, dan colbalt. Factor pertumbuhan yang dimaksud adalah komponen selular esensial yang tidak dapat disintesis sendiri oleh organisme yang berasal dari sumber dasar karbon dan nitrogen. Komponen selular berupa asam asam amino dan vitamin. Bagi organisme heterotroph, kebutuhan akan factor tumbuh sudah dapat dipenuhi oleh ekstrak daging atau kaldu nutrient. Berdasarkan sumber karbon yang digunakan organisme dibagi menjadi dua kelompok yaitu, autotroph dan heterotroph. Kelompok organisme autotroph merupakan kelompok organisme yang dapat mensintesis yang dapat mensintesis semua komponen selnya dari karbon dioksida. Sedangkan kelompok heterotroph merupakan organisme yang memerlukan satu atau lebih senyawa organik sebagia sumber karbonnya. Sebagian besar bakteri memerlukan sumber organik seperti glukosa atau asam asam amino (Lestari, 2017).

            Keberadaan medium sangat diperlukan bagi pertumbuhan mikroorganisme terutama bakteri. Medium merupakan substrata tau dasar makanan yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroba. Komponen dasar medium biasanya telah disesuaikan dengan jenis nutrisi yang diperlukan oleh mikroba tersebut (Lestari, 2017).

            Telah dikemukakan bahwa bakteri pada umumnya memperbanyak diri (berkembang) dengan jalan membagi diri. Di dalam suasana yang cukup baik, misalnya dalam media pembenihan, bakteri memperbanyak diri dengan cepat. Telah dapat diperhitungkan bahwa dalam waktu 10 jam, dari 1 bakteri bisa menjadi berjuta juta (Adam, 1995).

            Dalam jurnal Kuntoro (2013), mengemukakan daging sebagai media yang cocok bagi pertumbuhan organisme di mana daging merupakan bahan pangan yang bersifat mudah rusak (perishable food), hal ini disebabkan karena daging mengandung unsur zat gizi yang cukup baik. Unsur utama daging adalah air, protein, lemak, vitamin dan mineral. Adanya kandungan gizi tersebut mengakibatkan daging mudah rusak dan menjadi media yang sangat cocok bagipertumbuhan organisme terutama bakteri. Adanya kontaminasi bakteri pada daging akan berdampak pada penurunan mutu daging tersebut. Penurunan kualitas daging yang paling mudah dideteksi adalah menganalisa sifat fisik daging. Sama seperti penelitian Pristianingrum (2012), yang melakukan penelitian mengenai uji stabilitas mikrobiologi pembersihan gigi tiruan dengan bahan minyak atsiri kulit batang kayu manis yang melakukan identifikasi mikroba pathogen yang dia lakukan dengan cara menanam sedian pada media nutrient broth untuk memperkaya jumlah bakteri yang ingin dihasilkan.

            Adapun untuk formula media tumbuh yang sifatnya standar ditemukan oleh Czapek (1902-1903) dan kemudian disempurnakan oleh Dox (1910). Formula media tumbuh tersebut dapat memberikan daya dukung biakan yang seragam dan umur simpan relative lama. Formula untuk 1 liter larutan yaitu sebagai berikut:

a.       Air                         = 1.000 ml

b.      NaNO₃                        = 3,0 g

c.       K₂HPO₄                = 1,0 g

d.      MgSO₄^-7H            = 0,5 g

e.       KCl                       = 0,05 g

f.       FeSO₄^-7H₂             = 0,01 g

g.      Sukrosa                 = 30,0 g

h.      Agar                      = 15-20g

Walaupun media ini standar, tetapi tidak sepenuhnya merupakan substrat yang paling optimal untuk semua jenis bakteri. Setidaknya formula tersebut adalah media yang sifatnya moderat untuk pertumbuhan kebanyakan jenis bakteri serta memberikan pertumbuhan yang subut bagi substrat yang ingin dikembangkan (Suwahyono, 2009).

Menurut Lestari (2017), ada syarat syarat media agar mikroba dapat tumbuh dan berkembang biak di dalam media, yaitu:

a.       Bahwa di dalam media harus terkandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangbiakan mikroba.

b.      Media harus mempunyai tekanan osmosa, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba.

c.       Media harus dalam keadaan steril, artinya belum ditanam mikroba yang dimaksud, tidak ditumbuhi mikroba lain yang tidak diharapkan.

Dalam beberapa pembagian, media dibagi menjadi beberapa kelompok. Dalam Harti (2015), menjelaskan bahwa penggolongan media menjadi:

1.      Berdasarkan konsistensinya, ada 3 macam:

a.       Media padat (solid media), mengandung agar agar 1,2-1,5%, biasanya dalam bentuk plate agar (lempeng agar) atau slant agar (agar miring).

b.      Media semi padat (semi solid media), mengandung agar agar 0,6-0,75%, contoh media SIM (Sulfida Indol Motilitas) untuk pengamatan motilitas.

c.       Media cair (liquid media), tanpa mengandung bahan pemadat, contoh media Nutrien cair BHI (Brain Heart Infusion).

2.      Bedasarkan bahan penyusunnya, ada 2 macam

a.       Media alami, terdiri dari bahan bahan alami contohnya ekstrak kentang, sari wortel, dan ekstrak daging.

b.      Media sintesis (chemical defined media), terdiri dari bahan bahan yang telah diketahui komposisinya.

3.      Sifat dan fungsinya

a.       Media transport, merupakan media untuk pengiriman specimen atau sample, contoh Nutrien cair, Carry dan Blair media, media Stuart, dan lain sebagainya.

b.      Media diperkaya (enrichment media), merupakan media kompleks atau nutrient lengkap antara lain penambahan darah, fungsi untuk memperbanyak dan mempersubur microorganism, contohnya BHI.

c.       Media eksklusif (exclusive media), merupakan media dengan penambahan bahan tertentu untuk pertumbuhan organisme.

d.      Media selektif dan deferensiasi (selective and differential media), merupakan media dengan penambahan zat penghambat atau senyawa tertentu, sehingga dapat digunakan untuk membedakan golongan atau sifat mikroorganisme. Contohnya Endo Agar, untuk pertumbuhan bakteri batang, dan Gram negative sehingga koloni E.coli dapat berwarna merah metalik.

e.       Media umum (universal media), merupakan media dengan bahan yang dapat dipakai untuk pertumbuhan kelompok mikroorganisme \, contoh Nutrien Agar untuk pertumbuhan bakteri, PDA (potati dextrose agar) untuk pertumbuhan jamur.

f.       Media pengujian (assay media), merupakan media untuk pengujian sifat sifat fisiologis mikroorganisme atau reaksi biokimiawi, contoh media biokimia Citrat Agar dan SIM.

g.      Media perhitungan jumlah, merupakan media untuk menghitung jumlah sel secara tidak langsung, contoh metode plate count menggunakan PCA (Plate Count Agar) untuk menghitung jumlah bakteri.

h.      Medi apertumbuhan anaerob (reducting media), merupakan media yang mengandung senyawa pengikat oksigen dalam media, contoh medium tioglikolat untuk pertumbuhan bakteri anaerob.

i.        Media minimal (minimal media), merupakan media yang mengandung senyawa mineral tertentu dan digunakan untuk menumbuhkan golongan bakteri tertentu biasanya bakteri tanah, contoh media M 9.

j.        Media kompleks (complex media), merupakan media yang mengandung bahan bahan kompleks dan senyawa sintesis tertentu, contoh media Dubelco untuk kultur sel epitel.

BAB III

METODE PENELITIAN

A.    Waktu dan Tempat

Hari / Tanggal       : Kamis, 18 Januari 2018

Pukul                     : 13:00-15:00

Tempat                  : Laboratorium MIPA Universitas Negeri Makassar

B.     Alat dan Bahan

1.      Alat

a.       Neraca analitik …………. 1 buah

b.      Gelas ukur………………. 1 buah

c.       Batang pengaduk………... 1 buah

d.      Gelas kimia……………… 1 buah

e.       Erlemeyer………………... 1 buah

f.       Hot plate…………………. 1 buah

2.      Bahan

a)      Medium NB (Nutrien Broth)

1)      Ekstrak daging (beef) …… 0,6 g

2)      Pepton …………………... 1,0 g

3)      Aquades ………………… 200 mL

4)      Aluminium foil………….. 2 potong

5)      Kapas

b)      Medium NA (Nutrien Agar)

1)      Ekstrak daging (beef) …... 0,6 g

2)      Pepton ………………….. 1 gr

3)      Aquades ………………… 200 ml

4)      Bacto agar……………….. 3 gr

5)      Kapas

c)      PDA (Potato Dextrosa Agar)

1)      PDA sintetik ……………. 9,9 gr

2)      Bacto agar……………….. 5 gr

3)      Aquades ………………… 100 ml

d)     TEA (Touge Ekstrak Agar)

1)      Touge …………………. 20 gr

2)      Sulerosa ……………….. 12 gr

3)      Bacto agar ……………… 5 gr

4)      Aquades………………… 200 ml

C.    Cara Kerja

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A.    Hasil Penetilian

NO	NAMA MEDIUM	GAMBAR	KOMPOSISI	FUNGSI
1	NA (Medium Nutrient Agar		a.    Ekstrak daging (beef) 0,6 gr b.   Pepton 1 gr c.    Bacto agar 3 gr d.   Aquades 200 ml	Sebagai medium kultivasi dan enumerasi bakteri. Namun, dengan tambahan beberapa bahan seperti amilum (pati), serum, dan darah, medium nutrient agar juga dapat digunakan sebagai medium pengembangan mukroba tertentu serta bermanfaat dalam uji serologi dan biokimia untuk mengidentifikasi bakteri.
2	NB (Nutrient Broth)		a.    Ekstrak daging (beef) 0,6 gr b.   Pepton 1 gr c.    Aquades 200 ml	Digunakan untuk uji air dan produk daging. Bisa juga digunakan sebagai medium perkembang biakan mikroba sama seperti medium NA dan bisa juga digunakan untuk menumbuhkan jamur.
3	PDA (Potato Dextrosa Agar)		a.    PDA sinteti 9,9 gr b.   Bakto agar 5 gr c.    Aquades 100 ml	Media ini digunakan untuk menumbuhkan kapang (jamur) dan khamir. Selain itu PDA digunakan unruk enumerasi yeast dan kapang dalam suatu sample atau produk makanan.
4	TEA (Touge Ekstrak Agar)		a.   Tauge 20 gr b.   Sulerosa 12 gr c.   Bacto agar 2 gr d.  Aquades 200 ml	Digunakan dalam pertumbuhan khamir karena memiliki zat zat penunjang pertumbuhan khamir tersebut.

B.     Pembahasan

Dalam praktikum kali ini kami akan melakukan percobaan pembuatan medium mikroba yaitu NA, NB, PDA, dan TEA. Untuk mengamati mikroba di laboratorium kita harus menumbuhkannya dalam biakan yang murni. Medium ini diperlukan sebagai tempat tumbuhnya mikroba sehingga kita bisa mendapatkan bakteri tertentu yang ingin diamati

Dalam pembuatannya, sebelum mencampurkan seluruh bahan di gelas kimia, kami terlebih dahulu menimbang seluruh bahan dengan menggunakan neraca analitik yang menghasilkan perhitungan yang akurat. Setelah penimbangan barulah bahan dicampurkan di dalam gelas kimia bersamaan dengan masuknya aquades 200 ml dan diaduk aduk dengan batang pengaduk. Setelah pencampuran selesai dipanaskan di atas hot plate selama 15-20 menit dan terus diaduk dengan batang pengaduk sampai mendidih hingga seluruh bahan homogen dan kemudian setelah itu dimasukkan ke dalam Erlemeyer yang sudah disterilkan. Sebelum memasukkan ke dalam autoklaf kami menutup mulut erlemeyer dengan kapas yang selanjutnya dibungkus dengan aluminium foil. Fungsi dari ditutup kapas ini adalah agar tidak adanya mikroba yang tidak diinginkan mengkontaminasi medium yang telah dibuat. Setelah dibungkus kapas barulah kami memasukkan ke dalam autoklaf untuk sterilisasi. Menurut Pratiwi (2008) proses sterilisais dengan autoklaf dapat membunuh dapat membunuh mikroorganisme dengan cara mendenaturasi atau mengkoagulasi protein pada enzim dan membrane sel mikroorganisme. Proses ini juga dapat membunuh endosperm bakteri.

 Hasil yang ditemukan adalah untuk medium NB (Nutrium Broth) merupakan medium cair, sedangkan medium NA (Nutrien Agar), PDA (Potato Dextrose Agar), dan TEA (Touge Extract Agar) merupakan medium padat karena mereka mendapatkan tambahan bacto agar di dalamnya yang membuat medium itu menjadi padat.

BAB V

PENUTUP

A.    Kesimpulan

Dilihat dari fungsinya, medium merupakan suatu media untuk pembiakan mikroba tertentu yang ingin diamati karena mengandung nutrient dan zat zat yang memicu pertumbuhan mikroba. Medium dibedakan menjadi 3 yaitu, medium cair, medium semi padat, dan medium padat. Pada praktikum kali ini kami membut 2 medium yaitu medium cair (NB) dan medium padat (PDA, NA, dan TEA). Pemadatan medium itu disebabkan karena ditambahkan bakto agar di dalamnya.

B.     Saran

Diharapkan praktikan agar menggunakan masker dan handscoon selama proses praktikum berlangsung agar tidak terjangkit penyakit dari mikroba yang diamati.

DAFTAR PUSTAKA

Adam, Syamsuri. 1995. Dasar Dasar Mikrobiologi Dan Parasitologi Untuk Perawat. Jakarta : EGC Penerbit Buku Kedokteran.

Harti, Agnes Sri. 2015. Mikrobiologi Kesehatan : Peran Mikrobiologi Dalam Kesehatan. Yogyakarta : ANDI.

Kuntoro, B, dkk. 2013. Mutu Fisik Dan Mikrobiologi Daging Sapi Asal Rumah Potong Hewan (RPH) Kota Pekan Baru. Jurnal Peternakan. Vol (10), No (1) : 1-2 : 1829-8729.

Lestari, Purwaning Budi, dkk. 2017. Mikrobiologi Berbasis Inkuiri. Malang: Gunung Samudra.

Pristaningrum, Niken, dkk. 2012. Uji Stabilitas Mikrobiologis Pembersih Gigi Tiruan Dengan Bahan Minyak Atsiri Kulit Batang Kayu Manis (Cinnamomum burmanii). Jurnal Material Kedokteran Gigi. Vol (1), No (2) : 136 : 2302-5271.

Suwahyono, Untung. 2009. Biopestisida. Jakarta: Penebar Swadaya.